pcr检测主要是检测什么？什么是PCR检测

大家好，今天我为大家详解和pcr检测主要是检测什么相关的一些问题点，并且什么是PCR检测也一样有许多人对其还不熟悉，所以，在这篇文章里，我会尽力帮大家整理和分析这个问题。接下来，我们一起深入理解和学习吧！如果这篇文章对你们有帮助，欢迎关注和分享我们的网站，谢谢！

一、PCR的原理是什么

PCR原理：

DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。

PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。

PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：

①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；

②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；

③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。

重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

扩展资料：

特异性强 PCR反应的特异性决定因素为：

①引物与模板DNA特异正确的结合；

②碱基配对原则；

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。

灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中最小检出率为3个细菌。

PCR反应的延伸温度一般选择在70～75℃之间，常用温度为72℃，过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间，可根据待扩增片段的长度而定，一般1Kb以内的DNA片段，延伸时间1min是足够的。

3～4kb的靶序列需3～4min；扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增，延伸时间要稍长些。

循环次数循环次数决定PCR扩增程度。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30～40次之间，循环次数越多，非特异性产物的量亦随之增多。

参考资料：百度百科——PCR扩增

二、核酸病毒检测有PCR和快检,这两个检测方式有什么区别

检验核酸病毒有PCR和快检两种方式，一般常规PCR检测是在样品采集之后，要对样品进行核酸纯化，再进行后续的PCR反应，在这个过程中大约需要30~60分钟。在进行PCR检测的过程中，可以进行多个样本的检测，PCR反应的时间大约在两个小时左右。不同医院的仪器设备不同，仪器的好坏能够影响检测样本的多少，通常一个反应板可以同时检测96个样品。

核酸病毒快检主要是将采集的样本直接放入裂解液中，一般并不需要对核酸进行纯化，可以直接进行PCR反应。使用专门的快检仪器，核酸检测的时间要快很多，一般检验的样本在0.5~1.5小时之间出结果。对于一般医院核酸检测来说，使用的是PCR这种检测方式。因为一个批次可以同时进行多个样本的检测，可以更好的减少医院资源的浪费，减少医院的工作量。

核酸快速检测主要适用于特殊情况，一般医院都会特事特办。使用快检可以快速得到核酸报告，比如待检人数比较少，而且还受到医院的仪器设备限制。快速检测虽然能够让人们快速拿到检测报告，但是对于大量的人群筛查是没有优势的。核酸检测主要是利用PCR技术来检测生物体中核酸的过程，在人们的配合下，医护人员一般采用的是采集咽拭子的方式。

医护人员采集人们的少量咽拭子，根据其中病毒的浓度来确定是否是阳性，还是阴性。新冠肺炎病毒的核酸物质主要是RNA，在检验过程中通过技术可以将RNA进行逆转录，转化为DNA。 PCR技术可以通过特殊的酶在生物体外，对转录的DNA片段进行复制，再将DNA片段扩大，从而达到检测的目的。选择核酸检测的方式主要根据自己情况而定，主要依靠医生的判断。

三、什么是PCR检测

聚合酶链反应（PCR）的基本原理是一种酶促合成反应。即在模板DNA、引物和脱氧核糖核苷酸存在下，在DNA聚合酶的作用下，使DNA链扩增延伸。

试验先通过加热变性，使DNA双螺旋的氢链断裂，解离成单链DNA；然后通过退火，突然降温使引物与其互补的模板在局部形成杂交链；然后再在DNA聚合酶、脱氧核糖核苷三磷酸底物和镁离子存在的条件下，在聚合酶催化下，以引物为起始点，使DNA链延伸。

扩展资料：

PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。

反应特点：

特异性强；

灵敏度高；

简便、快速；

纯度要求低。

参考资料：

叶顺章.聚合酶链反应在性病诊断中的应用[J].中华皮肤科杂志, 1996(3):147-148.

百度百科-聚合酶链式反应